Topic description
La cachexie associée au cancer (CAC) est caractérisée par une inflammation systémique, une atrophie adipocytaire et une fonte musculaire sévère qui est responsable de près de 30 % des décès liés au cancer. Aucun traitement efficace n'existe à ce jour. Si le rôle de certaines cytokines tumorales est documenté, l'implication des tissus périphériques, notamment le tissu adipeux, comme émetteur de signaux pro-cachectique à distance reste méconnue bien que suggérée.
Dans nos modèles de cachexie chez la mouche Drosophila melanogaster, des tumeurs épithéliales reproduisent l'ensemble des caractéristiques de la CAC. Un crible génétique effectué sur les adipocytes a identifié REPTOR (REPressor of TOR), co-activateur transcriptionnel régulé par mTORC1, comme régulateur central : son invalidation dans les adipocytes restaure à la fois la masse lipidique locale et l'intégrité musculaire à distance. REPTOR contrôle la sécrétion et l'activité de TNF-a ; cytokine requise pour la fonte musculaire ; mais aussi de médiateurs intermédiaires encore inconnus. L'homologue mammifère de REPTOR, CREBRF, est associé à l'obésité et au diabète, ce qui suggère une conservation fonctionnelle évolutive.
Ce projet vise à décrypter comment REPTOR dans les adipocytes, en réponse à mTOR, orchestre la sécrétion et l'activation de TNF-a et entraine la fonte musculaire systémique. Quatre axes structureront la thèse :
-Cartographier le programme transcriptionnel dépendant de REPTOR dans le tissu adipeux cachectique.
Méthodes : Manipulations génétiques tissu-spécifiques combinées utilisant la puissante boîte à outil de la drosophile. RNA-seq sur tissus gras disséqués, analyse des candidats ciblée sur les voies de sécrétion, trafic intracellulaire et modification post-traductionnelle.
-Identifier et valider fonctionnellement les régulateurs adipocytaires de la sécrétion de TNF-a.
Méthodes : utilisation de RNAi in vivo ; localisation subcellulaire (microscopie confocale, marqueur endogènes fluorescents) et quantification de TNF-a circulant (ELISA, Western blot). quantification de l'intégrité musculaire (microscopie confocale, biochimie) ; etc.
-Disséquer le mécanisme moléculaire d'action de TNF-a sur les muscles périphériques.
Méthodes : utilisation de RNAi in vivo ;quantification de l'intégrité musculaire par microscopie confocale et approches biochimiques.
-Évaluer la conservation de ces mécanismes chez les mammifères (fonction de CREBRF dans les adipocytes et myotubes en culture).
Méthodes : mesure de la sécrétion de TNF-a par des adipocytes de mammifères génétiquement modifiés pour CREBRF et mesure de l'effet du milieu conditionné sur des myotubes afin de reconstituer la cascade CREBRF>TNF-a>atrophie musculaire in vitro.
Ce projet établira le rôle de REPTOR dans le tissu adipeux cachectique, identifiera des régulateurs inédits de la sécrétion de TNF-a et caractérisera la signalisation existant entre le tissu adipeux et le muscle. L'axe REPTOR/CREBRF représente une cible thérapeutique prometteuse pour préserver la masse musculaire des patients cancéreux qui est une priorité médicale sans réponse efficace à ce jour.
------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Cancer-associated cachexia (CAC) is characterized by systemic inflammation, adipose tissue atrophy, and severe muscle wasting, which is responsible for nearly 30% of cancer-related deaths. To date, no effective treatment exists. While the role of certain tumor-derived cytokines has been documented, the involvement of peripheral tissues, particularly adipose tissue, as sources of long-range pro-cachectic signals remains poorly understood, although it has been suggested.
In our cachexia models in Drosophila melanogaster, epithelial tumors recapitulate all features of CAC. A genetic screen performed in adipocytes identified REPTOR (REPressor of TOR), a transcriptional co-activator regulated by mTORC1, as a central regulator: its inactivation in adipocytes restores both local lipid stores and distant muscle integrity. REPTOR controls the secretion and activity of TNF, a cytokine required for muscle wasting, as well as other intermediate mediators that remain to be identified. The mammalian homolog of REPTOR, CREBRF, is associated with obesity and diabetes, suggesting an evolutionarily conserved function.
This project aims to decipher how REPTOR in adipocytes, in response to mTOR signaling, orchestrates the secretion and activation of TNF-a and drives systemic muscle wasting. The thesis will be structured around four main objectives:
-Map the REPTOR-dependent transcriptional program in cachectic adipose tissue.
Methods: Tissue-specific genetic manipulations using the powerful Drosophila toolkit. RNA-seq on dissected fat bodies, with candidate analysis focused on secretion pathways, intracellular trafficking, and post-translational modifications.
-Identify and functionally validate adipocyte regulators of TNF-a secretion.
Methods: In vivo RNAi; subcellular localization (confocal microscopy, endogenous fluorescent markers) and quantification of circulating TNF-a (ELISA, Western blot); assessment of muscle integrity (confocal microscopy, biochemical approaches), etc.
-Dissect the molecular mechanism of TNF-a action on peripheral muscles.
Methods: In vivo RNAi; quantification of muscle integrity using confocal microscopy and biochemical approaches.
-Assess the conservation of these mechanisms in mammals (role of CREBRF in cultured adipocytes and myotubes).
Methods: Measurement of TNF-a secretion by mammalian adipocytes genetically modified for CREBRF, and evaluation of the effect of conditioned medium on myotubes to reconstitute the CREBRF>TNF-a> muscle atrophy cascade in vitro.
This project will establish the role of REPTOR in cachectic adipose tissue, identify novel regulators of TNF-a secretion, and characterize signaling between adipose tissue and muscle. The REPTOR/CREBRF axis represents a promising therapeutic target to preserve muscle mass in cancer patients, a major unmet medical need.
------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Début de la thèse : 01/10/
Funding category
Public funding alone (i.e. government, region, European, international organization research grant)
Funding further details
Concours pour un contrat doctoral
En cliquant sur "JE DÉPOSE MON CV", vous acceptez nos CGU et déclarez avoir pris connaissance de la politique de protection des données du site jobijoba.com.