Vos missions en quelques mots Missions principales: L’ingénieur·e d’étude sera en charge de la mise en œuvre, de l’optimisation et de la réalisation d’expériences de biologie cellulaire et moléculaire (“wet lab”) au sein de l’équipe. Il/elle interviendra principalement sur l’isolement et la caractérisation de cellules issues de tissus humains et murins, leur analyse par cytométrie en flux, ainsi que sur des approches de biologie moléculaire, de culture cellulaire et de préparation d’échantillons pour des analyses de transcriptomique unicellulaire (scRNA-seq). Activités principales: · Isolement de cellules à partir de tissus humains (résections chirurgicales, biopsies) et murins (dissociation mécanique et enzymatique). · Conception, optimisation et réalisation de protocoles de cytométrie en flux : marquages de surface et intracellulaires panels multiparamétriques contrôle qualité des échantillons · Réalisation d’expériences de biologie moléculaire : extraction et purification d’ADN et d’ARN ligations d’ADN, PCR/qPCR, RT-qPCR préparation d’échantillons pour analyses aval · Préparation de cellules pour des expériences de scRNA-seq (viabilité, comptage, enrichissement, contrôle qualité). · Culture cellulaire : cellules primaires (humaines et/ou murines) lignées cellulaires · Réalisation de marquages en immunofluorescence sur cellules et/ou coupes tissulaires. · Participation à la gestion du laboratoire : suivi des stocks, commandes maintenance de base des équipements respect des procédures qualité et de biosécurité · Traçabilité des expériences, analyse critique des résultats et restitution aux responsables de projet. Profil recherché Connaissances: · Bases solides en biologie cellulaire et moléculaire. · Principes et applications de la cytométrie en flux. · Connaissances des techniques de culture cellulaire. · Notions de transcriptomique unicellulaire (scRNA-seq) et de préparation d’échantillons. · Connaissances générales en immunologie appréciées. Savoir-faire: · Maîtrise pratique des techniques d’isolement cellulaire à partir de tissus complexes. · Mise en œuvre autonome de protocoles de cytométrie en flux multiparamétrique. · Réalisation rigoureuse de manipulations de biologie moléculaire (ADN/ARN). · Culture et maintenance de cellules primaires et de lignées cellulaires. · Réalisation de marquages en immunofluorescence. · Capacité à optimiser et adapter des protocoles existants. · Rédaction de cahiers de laboratoire clairs et exploitables. Aptitudes: · Rigueur expérimentale et sens de l’organisation · Autonomie et fiabilité dans la conduite des expériences · Esprit critique face aux résultats expérimentaux · Capacité à travailler en équipe et à interagir avec différents profils scientifiques · Bon sens des priorités et respect des délais Expérience(s) souhaité(s): · Expérience préalable (≥ 2 ans souhaitée) en laboratoire de recherche ou plateforme technologique. · Pratique avérée de la cytométrie en flux. · Expérience sur tissus humains et/ou modèles murins fortement appréciée. · Une expérience en scRNA-seq ou en préparation d’échantillons pour des technologies unicellulaires est un atout. Niveau de diplôme et formation(s): · Master 2 ou Diplôme d’ingénieur en biologie, biotechnologies, immunologie ou disciplines apparentées. · Formation spécifique en cytométrie en flux et/ou biologie moléculaire appréciée. Éléments de candidature Personnes à contacter charles-antoine.dutertre@u-pec.fr
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