Mission : Dans le cadre des projets de thérapie génique du laboratoire, la personne apportera son soutien technique aux expériences in vivo et aux analyses histologiques visant à évaluer l'efficacité, la biodistribution et l'innocuité des vecteurs viraux dans le système nerveux central. Activités : - Assistance lors des interventions chirurgicales in vivo, incluant la préparation du matériel pour les injections stéréotaxiques et le suivi post-opératoire des animaux, sous la supervision directe d'une personne expérimentatrice autorisée. - Traitement histologique des tissus cérébraux : perfusion transcardiaque (assistance technique), cryoprotection, congélation et cryocoupe en vue des analyses post-injection. - Mise en œuvre de protocoles d'immunohistochimie (IHC) et d'immunofluorescence (IF) sur coupes flottantes et coupes montées. - Participation à la description de la biodistribution des vecteurs viraux dans les différentes régions du cerveau, en appui aux ingénieurs de recherche de l'équipe. - Participation aux observations comportementales des animaux dans le cadre des protocoles expérimentaux. - Culture cellulaire de base : maintenance de cultures primaires (selon les besoins du projet). - Consignation rigoureuse des données, rédaction et mise à jour des protocoles expérimentaux. - Application des règles d'hygiène, de sécurité et de bien-être animal (APAFIS, OGM classe 2) et gestion courante du laboratoire (stocks, commandes, maintenance de premier niveau du matériel). - Préparation et vérification du matériel chirurgical avant les interventions (instruments, solutions) - Aide au suivi post-opératoire des animaux et enregistrement des observations dans les fiches de suivi, sous supervision. - Participation aux observations comportementales selon les protocoles en vigueur, en présence d'un membre habilité de l'équipe. - Assistance lors des perfusions transcardiaques et de la dissection, sous la supervision d'une personne expérimentatrice autorisée. - Traitement post-fixation des tissus : cryoprotection, congélation, coupe au cryostat, et préparation des coupes flottantes ou montage sur lame selon les besoins du protocole. Montage the coupes sur lames après la IHC/IF. - Réalisation de protocoles immunohistochimie (IHC) et immunofluorescence (IF) multiplex. - Participation à l'optimisation des couples anticorps primaires/secondaires selon les cibles d'intérêt, en appui à l'ingénieur de recherche responsable. - Montage the coupes sur lames après la IHC/IF. - Acquisition d'images au microscope à épifluorescence et contribution aux analyses quantitatives avec ImageJ/FIJI ou QuPath. - Assistance à la préparation de cultures primaires si nécessaire. - Suivi des stocks de consommables et réactifs liés à la culture cellulaire ; signalement des besoins de réapprovisionnement au responsable. - Rédaction et mise à jour des protocoles et cahiers de laboratoire. - Gestion des stocks de réactifs et consommables du laboratoire. - Application des procédures de sécurité : gestion des déchets biologiques (DASRI), produits chimiques CMR (PFA, DAB), OGM classe 2. - Participation aux déclarations et suivis réglementaires liés à l'expérimentation animale (APAFIS), en appui au personnel habilité.
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