La personne recrutée aura pour mission de participer en collaboration avec un chercheur à la réalisation de bout en bout d’expériences de suivi de la morbidité, de la mortalité, et des réponses des cellules natural killer (NK) spléniques de souris contrôles ou déplétées de différentes populations de cellules myéloïdes, et transplantées avec une lignée de lymphome T génétiquement modifiée pour être susceptible à un contrôle transitoire par les cellules NK.
Activités
1) Gérer les colonies de souris mutantes utilisées dans le projet.
a) Surveiller les stocks et la reproduction ses lignées via le logiciel dédié (Expeboard).
b) Être responsable de la production et du génotypage par PCR des souris nécessaires aux expériences.
c) S’assurer de l’application de la demande d’autorisation de projet (DAP) approuvée par le comité d’éthique et le ministère, et plus généralement du respect des règles d’éthique de l’expérimentation animale dans le cadre du projet.
2) Cultiver la lignée de cellules tumorales et préparer la suspension cellulaire devant être injectées dans les animaux.
3) Injecter la suspension de cellules tumorales dans la veine de la queue des souris récipients.
4) Préparer la solution de toxine diphtérique; l’injecter par voie intrapéritonéale dans les animaux des groupes expérimentaux correspondants; injecter par voie intrapéritonéale le véhicule dans les animaux des groupes contrôles.
5) Suivre les souris en cours d’expérimentation [pesée, évaluation de leur éventuelle souffrance via la grille de score de la DAP, mise en place des mesures de raffinement éventuellement nécessaires pour soulager leur souffrance, euthanasie des animaux ne pouvant pas être soulagés ou en fin d’expérience pour procéder aux analyses biologiques].
6) Prélever des organes (rate) et préparer les suspensions cellulaires; marquer les cellules avec des anticorps couplés à des fluorochromes; acquérir les données en cytométrie en flux multiparamétrique et les analyser.
7) Participer aux tâches communes de gestion du laboratoire (gestion des stocks, passage puis réception des commandes, rangement et nettoyage des espaces de travail …).
Compétences
1) Très bonne maitrise de l’expérimentation animale (niveau applicateur ou concepteur ; excellente connaissance des règles éthiques ; manipulation et préhension des animaux ; savoir évaluer la souffrance des souris et mettre en place les mesures nécessaires pour y pallier ; injections intrapéritonéales ; injections dans la veine de la queue; procédures d’euthanasie et de prélèvements d’organes).
2) Expérience en gestion de lignées de souris (élevage, génotypage).
3) Expérience en biologie moléculaire : extraction ADN, PCR.
4) Très bonne maitrise de la culture cellulaire.
5) Très bonne maitrise de la cytométrie en flux multiparamétrique (préparation de suspensions cellulaires à partir d’organes ; marquages cellulaires multi-couleurs ; acquisition des échantillons sur cytomètre analyseur à plus de 10 couleurs ; analyse des données avec un logiciel tel DIVA ou FlowJo).
6) Maitrise de la langue anglaise, présentation en anglais de ses propres résultats au cours des réunions d’équipe.
Savoir-être
Capacité à travailler en équipe.
Aisance relationnelle.
Sens de l'organisation.
Rigueur, Fiabilité.
Autonomie, Confiance en soi.
Sens de l'initiative.
Diplôme
Bac +5 : Master en Immunologie ou Biologie Cellulaire ou dans une discipline connexe.
Contexte de travail
Unité mixte de recherche du CNRS, de l’INSERM et d’Aix-Marseille Université, le CIML est composé d’environ 200 personnes et 16 équipes de recherche et situé sur le parc scientifique et technologique de Luminy à Marseille (France). Au sein du CIML, la personne recrutée travaillera dans l'équipe de recherche "Cellules dendritiques et immunité antivirale" sous la supervision directe du responsable de l’équipe, Marc Dalod. Le projet de recherche sera effectué en collaboration avec l’équipe d’Eric Vivier au CIML, à Marseille, et l’équipe de Thierry Walzer au CIRI, à Lyon. La personne recrutée interagira avec les membres de l’équipe de Marc Dalod, en particulier avec l’assistante ingénieur de l’équipe, Camille Pierini-Malosse, et en étroite collaboration avec un chercheur post-doctorant de l’équipe d’Eric Vivier, le Dr. Kévin Pouxvielh.
Unité mixte de recherche du CNRS, de l’INSERM et d’Aix-Marseille Université, le CIML est composé d’environ 200 personnes et 16 équipes de recherche et situé sur le parc scientifique et technologique de Luminy à Marseille (France). Au sein du CIML, la personne recrutée travaillera dans l'équipe de recherche "Cellules dendritiques et immunité antivirale" sous la supervision directe du responsable de l’équipe, Marc Dalod. Le projet de recherche sera effectué en collaboration avec l’équipe d’Eric Vivier au CIML, à Marseille, et l’équipe de Thierry Walzer au CIRI, à Lyon. La personne recrutée interagira avec les membres de l’équipe de Marc Dalod, en particulier avec l’assistante ingénieur de l’équipe, Camille Pierini-Malosse, et en étroite collaboration avec un chercheur post-doctorant de l’équipe d’Eric Vivier, le Dr. Kévin Pouxvielh.
Contraintes et risques
Manipulation de toxine diphtérique nécessitant une vaccination à jour contre cette toxine.
Nécessité de travailler parfois en horaires décalés (début des expérimentations tôt le matin et/ou fin tard le soir).
Manipulation de toxine diphtérique nécessitant une vaccination à jour contre cette toxine.
Nécessité de travailler parfois en horaires décalés (début des expérimentations tôt le matin et/ou fin tard le soir).
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