Ce projet vise à étudier la dérégulation des points de contrôle (DNA damage checkpoints) de l'ADN dans les cancers de l'ovaire séreux de haut grade (HGSOC) et leur sensibilité différentielle à des inhibiteurs pharmacologiques de ceux-ci en fonction des mutations génétiques présentes, en vue d'établir une valeur prédictive.
Activités
Générer des lignées cellulaires non-transformées et cancéreuses (de type HGSOC) stables et génétiquement modifiées exprimant des senseurs des points de contrôle de l'ADN ainsi que différentes protéines (marqueurs fluorescents) de manière constitutive et/ou inductible.
- Analyser la régulation et les propriétés des points de contrôle de l'ADN en absence et suite à des stress génotoxiques.
Introduire de manière transitoire ces senseurs dans des cellules issues de tumeurs de l'ovaire (cultures primaires d'ascites).
- Réaliser des expériences de biologie moléculaire et cellulaire (clonage d'ADN, culture cellulaire, transfection et/ou infection lentivirale, édition du génome par CRIPSR/Cas9 : Knock-Out et Knock-In).
- Réaliser des expériences de vidéo-microscopie sur cellules vivantes avec des approches de perturbations fonctionnelles (drogues).
- Analyser quantitativement des événements cellulaires sur les images de vidéo-microscopie.
- Présentation des données : réunions de laboratoire, séminaires internes et externes en anglais.
Compétences
- Le plus important, bon relationnel et capacité à travailler en équipe.
- Posséder une expérience en laboratoire de recherche d'au moins 6 mois à plein temps.
- Grande rigueur dans la réalisation des expériences.
- Excellentes aptitudes en matière d'organisation.
- Posséder de solides compétences en biologie moléculaire et cellulaire : clonage d'ADN, culture et entretien de lignées cellulaires de mammifères, transfection/infection, voire modification génétique par CRISPR/Cas9,.
- Posséder des compétences en microscopie de fluorescence (sur cellules fixées et/ou vivantes).
- Avoir une expérience dans l'analyse d'images biologiques.
- Bonne maîtrise de la langue anglaise.
Contexte de travail
Notre équipe fait partie de l'unité de recherche UMR9019 CNRS "Intégrité des Génomes et Cancers" située à l'Institut Gustave Roussy (métro ligne 14) - Université Paris-Saclay, un centre de recherche leader sur le cancer en Europe. L'Institut dispose de différentes plateformes sur site pour l'imagerie sur cellules vivantes (vidéo, confocal, spinning disk, microscope à super résolution), l'imagerie intravitale chez l'animal, la cytométrie en flux, la bio-informatique et la génomique. La personne recrutée bénéficiera d'un environnement scientifique stimulant avec plusieurs groupes de recherche travaillant sur le maintien de l'intégrité génétique et les mécanismes de réplication/réparation de l'ADN.
Notre équipe fait partie de l'unité de recherche UMR9019 CNRS "Intégrité des Génomes et Cancers" située à l'Institut Gustave Roussy (métro ligne 14) - Université Paris-Saclay, un centre de recherche leader sur le cancer en Europe. L'Institut dispose de différentes plateformes sur site pour l'imagerie sur cellules vivantes (vidéo, confocal, spinning disk, microscope à super résolution), l'imagerie intravitale chez l'animal, la cytométrie en flux, la bio-informatique et la génomique. La personne recrutée bénéficiera d'un environnement scientifique stimulant avec plusieurs groupes de recherche travaillant sur le maintien de l'intégrité génétique et les mécanismes de réplication/réparation de l'ADN.
Contraintes et risques
L'infection lentivirale sera réalisée en laboratoire de confinement P3.
Notre institut assure une formation obligatoire pour l'accès et l'utilisation du P3.
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