Mission :
Déterminer comment les ligands de G-quadruplexes (G4) assurent leurs effets sur les cellules humaines et montrer que ces propriétés peuvent être contrôlées.
Activités :
Sous la direction des responsables du projet, la personne recrutée devra : Maintenir en culture plusieurs lignées cancéreuses ; Evaluer l'activité cytotoxique de petites molécules par des essais de viabilité (SRB) ; Construire des lignées cellulaires humaines inactivées par CRISPR/Cas9 ou par des shRNA inductibles pour des gènes d'intérêt ; Introduire des mutations d'intérêt dans des lignés cellulaires humaines en utilisant le Prime Editing et/ou le Base Editing et/ou des complémentations par des ADNc sauvages ou mutants ; Préparer des extraits protéiques à partir de lignées humaines en culture ; Analyser la modulation de voies de signalisation par western-blot (du traitement des cellules jusqu'à la révélation) ; Analyser par immunofluorescence la localisation cellulaire de protéines d'intérêt ; Analyser par imagerie et cytométrie en flux le cycle cellulaire et des marqueurs de dommages de l'ADN, de stress, de voies de signalisation et d'activités cellulaires ; Analyser par imagerie les effets des ligands sur la stabilité du génome et sur la transcription ; Réaliser de l'imagerie en utilisant la chimie « click » pour révéler la distribution de petites molécules et les colocaliser avec des structures cellulaires ; Identifier les protéines associées à des ligands fonctionnalisés en utilisant la chimie « click » ; Isoler des clones résistants à des petites molécules cytotoxiques ; Extraire des ARN pour des analyses de RNA-seq.
Outre les travaux expérimentaux la personne recrutée devra participer de façon active (présentation des données, discussions) aux réunions d'équipe ainsi qu'aux réunions de travail avec nos collaborateurs scientifiques.
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