Vos missions en quelques mots Missions : La mission principale de ce poste consistera à produire des protéines et à caractériser leurs propriétés d’interaction avec les lanthanides et des métaux de transition. Ce CDD de 16 mois sera réalisé dans le cadre de l’ANR Lanthanomips. II s’inscrit dans un objectif plus large d’identification des protéines qui fixent de façon affine et sélective les terres rares chez Pseudomonas putida. La mission est très largement expérimentale mais comporte également un volet de compte rendu rigoureux et un partage des résultats sous forme de présentations au sein de l’équipe. Activités : - Cultures de Pseudomonas putida sans différentes conditions (préparation des milieux, maintien des souches, culture sur différents substrats carbonés) - Expression hétérologue dans E. coli, de différentes protéines - Purification de protéines selon différents critères (affinité, échange d’ions, hydrophobicité, taille) - Caractérisation des protéines par spectroscopie de fluorescence, nanoDSF, IRTF - Préparation de biotes de cristallographie - Compte rendu des expériences, partage des informations au seuin de l’équipe projet et de l’équipe par des présentations informelles et plus formalisées Contexte de travail : L'Institut de Biosciences et Biotechnologies Aix Marseille (BIAM) est une Unité Mixte de Recherche (UMR) composée d'une centaine de salariés permanents et d'une cinquantaine de salariés non permanents (CDD, doctorants et post-doctorants, stagiaires). L'UMR est implantée sur le site du CEA Cadarache et sur le Campus de la Faculté des Sciences de Luminy. Les projets de recherche fondamentale du BIAM ont pour objectifs la compréhension des mécanismes impliqués dans la réponse et l’adaptation des organismes vivants aux contraintes environnementales et le développement des technologies dédiées à la préservation de la qualité de notre environnement. Ils sont conduits selon plusieurs approches pluridisciplinaires sur des organismes modèles (algues, plantes, bactéries) ou sur les organismes les plus adaptés à partir d'études de la biodiversité. Ce poste concerne l’équipe « Interactions Protéine – Métal », dirigée par Virginie Chapon, située sur le site du CEA Cadarache. Le projet est financé par l’ANR (projet Lanthanomips) et consiste à identifier et caractériser le lanthanoprotéome de Pseudomonas putida. Dans le cadre de ce projet, il s’agit d’identifier et de caractériser sur le plan biochimique et des propriétés d’interaction avec les métaux des protéines fixatrices de terres rares chez la bactérie P. putida. Le CDD sera encadré par Catherine Berthomieu (catherine.berthomieu@cea.fr) Profil recherché Competences : - Autonomie en microbiologie, pour la manipulation de souches, la préparation de milieux, maitrise de la stérilité - Compétences en biologie moléculaire pour la transformation de souches d’expression - Autonomie pour la purification de protéines sur Ni-IMAC, SEC, colonnes échangeuses d’ion, connaissance des systèmes AKTA. - Maitrise des approches de fluorimétrie et d’analyse des données pour le calcul de Kb, bonne maitrise - Maitrise de l’acquisition de données de spectroscopie IRTF (système Bruker) - Bonnes notions de qualité - Autonomie pour le compte rendu des expériences Contraintes et risques : Travail sur site. Manipulation de CMR. Niveau d'études minimum requis Niveau Niveau 5 Diplômes de niveau bac 2 Spécialisation Sciences naturelles (biologie-géologie) Langues Français Seuil
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