Passionné par l’édition génomique et l’imagerie cellulaire de pointe, vous souhaitez vous investir dans un projet ambitieux visant à décrypter les mécanismes moléculaires du bourgeonnement du virus du SIDA. Vous mettrez en œuvre des approches innovantes combinant l’édition génétique de lignées cellulaires (CRISPR-Cas9) et la microscopie TIRF.
Rejoignez-nous en tant qu’ingénieur d’études pour un CDD de 24 mois au sein de l’Institut de Biologie Structurale (IBS/IRIG).
En tant qu’ingénieur d’études, vous aurez un rôle central dans le projet. Vos missions principales seront :
1. Développement de lignées cellulaires éditées par CRISPR-Cas9. Mettre en œuvre des stratégies d’édition génomique (CRISPR-Cas9) pour insérer des protéines fluorescentes en fusion avec les protéines CHMP4B et CHMP2A dans leur loci chromosomiques endogènes. Optimiser les approches de modification in situ (design des guides, matrices HDR, validation clonale). Caractériser et valider les lignées obtenues (PCR, séquençage, western blot et microscopie).
2. Imagerie sur cellules vivantes et analyse quantitative. Réaliser des acquisitions en microscopie TIRF pour capturer les événements rares de recrutement des protéines CHMP2A et CHMP4B aux sites de bourgeonnement du virus du sida. Quantifier les cinétiques de recrutement, d’assemblage et de désassemblage de ces protéines. Analyser l’impact de mutants (VPS4B R253A) et d’outils pharmacologiques inhibiteurs sur la dynamique des complexes CHMP2A et CHMP4B
3. Analyse, valorisation et gestion de projet. Analyser et interpréter les données quantitatives issues des expériences. Participer à la rédaction de rapports, figures et publications scientifiques. Contribuer à la coordination technique des taches en interaction avec les doctorant et chercheurs de l’équipe.
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