Déterminer comment les ligands de G-quadruplexes (G4) assurent leurs effets sur les cellules humaines et montrer que ces propriétés peuvent être contrôlées.
Activités
Sous la direction des responsables du projet, la personne recrutée devra : Maintenir en culture plusieurs lignées cancéreuses ; Evaluer l'activité cytotoxique de petites molécules par des essais de viabilité (SRB) ; Construire des lignées cellulaires humaines inactivées par CRISPR/Cas9 ou par des shRNA inductibles pour des gènes d'intérêt ; Introduire des mutations d'intérêt dans des lignés cellulaires humaines en utilisant le Prime Editing et/ou le Base Editing et/ou des complémentations par des ADNc sauvages ou mutants ; Préparer des extraits protéiques à partir de lignées humaines en culture ; Analyser la modulation de voies de signalisation par western-blot (du traitement des cellules jusqu'à la révélation) ; Analyser par immunofluorescence la localisation cellulaire de protéines d'intérêt ; Analyser par imagerie et cytométrie en flux le cycle cellulaire et des marqueurs de dommages de l’ADN, de stress, de voies de signalisation et d'activités cellulaires ; Analyser par imagerie les effets des ligands sur la stabilité du génome et sur la transcription ; Réaliser de l'imagerie en utilisant la chimie « click » pour révéler la distribution de petites molécules et les colocaliser avec des structures cellulaires ; Identifier les protéines associées à des ligands fonctionnalisés en utilisant la chimie « click » ; Isoler des clones résistants à des petites molécules cytotoxiques ; Extraire des ARN pour des analyses de RNA-seq.
Outre les travaux expérimentaux la personne recrutée devra participer de façon active (présentation des données, discussions) aux réunions d’équipe ainsi qu’aux réunions de travail avec nos collaborateurs scientifiques.
Compétences
Niveau BAC+5: diplôme de Master ou d'Ingénieur ; Prérequis : expérience en culture cellulaire de lignées humaines, Biologie Moléculaire et Western-blot ; Compétences expérimentales en : culture cellulaire, Western-blot, biologie moléculaire, extraction ADN/ARN, qPCR, immunofluorescence, imagerie par microscopie de fluorescence ; Connaissances générales sur le cancer et les structures secondaires de l'ADN ; Sens de l'organisation, rigueur scientifique, suivi des protocoles, connaissances des BPL ; Capacité à organiser son travail de façon autonome et méthodique, en coordination avec les autres membres de l'équipe ; Capacité à s'intégrer dans une équipe de recherche académique, dans le respect des horaires et du travail des autres membres de l'équipe ; Capacité à tenir un cahier de laboratoire, à mettre en forme les résultats et à les présenter.
Contexte de travail
Le poste d'Ingénieur d'Etudes est ouvert au sein de l'Institut de Pharmacologie et de Biologie Structurale (IPBS) de Toulouse dans l'équipe « Deciphering & drugging DNA Repair» dirigée par Sébastien Britton. L'Ingénieur.e sera sous la supervision de Dennis Gomez et de Sébastien Britton. Ce contrat s'inscrit dans le programme de recherche financé par l'ANR « TOP2-G4 » destiné à caractériser comment les ligands de G-quadruplexes (G4) assurent leurs effets cellulaires et montrer que ces propriétés peuvent être contrôlées.
Le poste se situe dans un secteur relevant de la protection du potentiel scientifique et technique (PPST), et nécessite donc, conformément à la réglementation, que votre arrivée soit autorisée par l'autorité compétente du MESR.
Le poste se situe dans un secteur relevant de la protection du potentiel scientifique et technique (PPST), et nécessite donc, conformément à la réglementation, que votre arrivée soit autorisée par l'autorité compétente du MESR.
Le poste d'Ingénieur d'Etudes est ouvert au sein de l'Institut de Pharmacologie et de Biologie Structurale (IPBS) de Toulouse dans l'équipe « Deciphering & drugging DNA Repair» dirigée par Sébastien Britton. L'Ingénieur.e sera sous la supervision de Dennis Gomez et de Sébastien Britton. Ce contrat s'inscrit dans le programme de recherche financé par l'ANR « TOP2-G4 » destiné à caractériser comment les ligands de G-quadruplexes (G4) assurent leurs effets cellulaires et montrer que ces propriétés peuvent être contrôlées.
Le poste se situe dans un secteur relevant de la protection du potentiel scientifique et technique (PPST), et nécessite donc, conformément à la réglementation, que votre arrivée soit autorisée par l'autorité compétente du MESR.
Le poste se situe dans un secteur relevant de la protection du potentiel scientifique et technique (PPST), et nécessite donc, conformément à la réglementation, que votre arrivée soit autorisée par l'autorité compétente du MESR.
Contraintes et risques
Travail en PSM L2.
Travail en PSM L2.
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